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DMEM/F-12培养基(Dulbecco's Modified Eagle Medium/Nutrient Mixture F-12)是DMEM培养基和Ham's F-12培养基的1:1混合物，是在DMEM培养基的基础上，添加F-12培养基中更为丰富的营养成分，含有多种微量元素。Dulbecco改良Eagle培养基（DMEM）是改良的Eagle基本培养基（BME），氨基酸和维生素浓度是BME的四倍。Ham's F-12以Ham's F-10培养基为基础，显著提高了胆碱、肌醇、腐胺和几种氨基酸的浓度。DMEM/F-12被广泛用于支持多种哺乳动物细胞的生长，包括MDCK、神经胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞和大鼠的成纤维细胞等。同时，DMEM/F12常作为开发无血清培养基的基础，也适用于低血清含量下哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养。

L-谷氨酰胺是细胞培养液体环境中所必需的一种营养成分，但其在水溶液中不稳定，易降解。丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，在葡萄糖不足的情况下，细胞也可以代谢丙酮酸钠。HEPES是一种优良的生物缓冲剂，对细胞无毒性作用，培养基添加HEPES后能够较长时间保持恒定的pH范围，可以有效的防止培养液pH波动较大对细胞生长状态产生的不利影响。